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载体构建

 

1)实验介绍

为了满足研究的需要,我们需要按照自己的意愿有目的的去构建和改造载体,最终实现自己的研究目的。其中基因的过表达、沉默;基因启动子分析、micRNA对目的基因的调控等都可能涉及到载体构建。

本公司凭借长期分子生物学工作的丰富经验,可为您提供高效、快捷的载体构建服务。同时可根据已有载体进行改造方案的设计,完成现有载体不同功能元件的改造,也可以应客户要求将指定片段亚克隆至各载体中 

基因功能研究通常从两方面入手:基因沉默与基因过表达,质粒载体是最方便的工具,为了使克隆的基因在宿主细胞中大量表达。我们可以根据您提供的已知参考序列(NCBI),以总

样本要求:实验用模板等(具体情况具体分析) 

交付结果:实验流程报告、剩余材料及产物、测序峰图、目的基因的质粒及甘油菌等 

交付时间:大约15-25个工作日(根据预实验、样本数量情况决定)

RNA为模板,获取您所需要的某个区域的一段基因。

2)服务项目

Luciferase报告基因载体构建(microRNA/lncRNA靶基因验证、启动子活性分析)

mRNA/microRNA/lncRNA过表达载体构建

shRNA干扰载体构建

载体点突变 

无内毒素质粒大提 

3)服务流程

引物设计合成 

根据目的片段类型选取合适的模板钓取目的基因 

通过PCR连接接头

酶切线性化载体 

将载体与目的片段连接并转化感受态细胞 

菌落PCR验证  

验证正确的送测序公司测序

4)样本要求

1需提供目的片段序列及载体名称

2需指定插入位点,如果不指定插入位点,默认插入到载体的MSC区域  

3本公司可以提供人、大鼠、小鼠的基因模板,其它物种需提供连接在载体上的目的片段或模板。  

4如果公司没有待克隆的载体,则需要客户提供载体。

 

分子生物学实验