酶联免疫吸附实验（elisa）

（1）实验介绍

酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成比例。 这种有色产物可用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。

在收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。建议新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在70℃条件下保存，避免反复冻融。

ELISA可以检测分泌型蛋白、组织细胞裂解液（胞/核内蛋白）、组蛋白甲基化/磷酸化/乙酰化检测等。

（2）服务流程

1）接收样本以及ELISA试剂盒，实验室可以有偿提供常备试剂盒或者帮客户代购。

2）预实验确定样本中蛋白表达丰度以及试剂盒效果。

3）正式实验，5-10个工作日内完成，根据检测指标数量多少相应变化。

4）出具实验报，数据分析。

（3）样本要求

可以接收样本有：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上等；样本来源为人和大小鼠。

1）血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，2000-3000rpm离心20分钟左右。仔细收集上清，提取后保存于-80℃或者液氮。

2）血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后， 2000-3000rpm离心20分钟左右，提取后保存于-80℃或者液氮。

3）胸腹水、脑脊液、尿液：用无菌管收集。2000-3000rpm离心10分钟左右。提取后保存于-80℃或者液氮。

4）细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。2000-3000rpm离心10分钟左右，提取后保存于-80℃或者液氮。

5）培养细胞：每个实验组细胞数量保证大于106以上，细胞状态良好， 保证运输到实验室的细胞为活细胞。

6）组织标本：组织重量要求大于100mg，保存于-80℃或者液氮。

7）其他：特殊样本根据具体情况安排实验方案。

（4）其他

交付结果：实验报告、结果的分析

质量保证：客观、公正、可信的实验结果

交付时间：大约10-15个工作日（根据预实验、样本数量情况决定）