免疫共沉淀CoIP

（1）技术原理

细胞裂解后，孵育结合了抗体的珠子，诱饵蛋白通过其抗体结合到Beads上，同时诱饵蛋白的互作蛋白，也一起“共沉淀”到Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后，再用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来，便得到免疫共沉淀CoIP产物。CoIP产物既可用Western Blot检测已知蛋白，也可用质谱鉴定未知蛋白。

当没有合适的诱饵蛋白抗体时，可以通过表达融合了Flag标签的诱饵蛋白，利用Flag标签做免疫沉淀。即细胞过表达Flag-Bait，经裂解后与anti-Flag珠子孵育，诱饵融合蛋白与Beads结合，其互作蛋白“共沉淀”到Beads上，再经洗涤、洗脱后用WB或质谱检测。

（2）几种蛋白互作技术特点

1）GST pull down：体外表达诱饵蛋白，简单易行，适合无IP级别抗体、又不易转基因的情况；

2）AP-MS：体内表达带标签的诱饵蛋白，洗脱产物无抗体污染，适合无IP级别抗体、但易转基因的情况；

3） TAP-MS：体内表达带双标签的诱饵蛋白，两次纯化，非特异结合蛋白更少，适合无IP级别抗体、但易转基因的情况；

4） CoIP：基本是天然蛋白复合物分离，能比较好的反应体内真实的蛋白互作情况，适合于有非常好的IP级别抗体的情况；

5） SILAC-IP：可定量鉴定分析体内蛋白复合物，适合于可传代细胞，尤其是易转基因细胞。

（3）免疫共沉淀CoIP服务优势

1）近十年服务经验，服务客户众多，案例发表在Nature Cell Biology、Nature Plants、Cancer Research等知名期刊上；

2）对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻，擅长针对客户具体情况提出合适的方案建议；

3）自有分子及细胞生物实验平台，能有效制定并执行最优的实验路线；

4）自有蛋白质组学平台，对微量CoIP实验产物的质谱鉴定有十足的把控能力，对后续的生物信息分析有独到的见解；

5）售后技术支持将一直保持到客户发表文章，确保客户安心免疫共沉淀下游实验及投稿。