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全转录组测序

(1)产品概述

转录组,广义上指某一生理条件下,细胞内所有转录产物的集合,包括mRNA,rRNA,tRNA以及其他non coding RNA,狭义上指mRNA 集合。

转录组测序,利用高通量测序技术,全面快速获取某一物种特定组织或器官在某一状态下的所有mRNA的序列信息。

(2)应用领域:

◆ 肿瘤的发生发展机制

◆ 复杂疾病的分子机制

◆ 药物作用靶点及机制研究

◆ 胚胎发育研究

◆ 环境毒理研究

(3)技术路线

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(4)研究内容

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(5)技术参数

1)样本要求

新鲜动物组织:≥0.3g

新鲜培养细胞:≥5×106个

新采集的全血:≥5ml

PAXgene 采血管:≥2管

RNA要求:

样品浓度:≥50 ng/ul

样品体积:>10ul

样品总量:>2ug

样品纯度:RIN≧6.5 (动物)、6(植物、真菌),OD260/280≧1.8,OD260/OD230≧1

2)测序策略:PE150

3)推荐数据量:6G以上

4)测序平台:Novaseq,MGIseq2000

(6)研究结论

急性淋巴细胞白血病(T-ALL)是一种恶性侵袭性血液肿瘤,本研究发现SHQ1在T-ALL中高度表达,SHQ1缺失会诱导T-ALL细胞的死亡,增加动物存活率。为阐释具体作用机制,作者利用RNA-seq发现缺失SHQ1会影响RNA的正常剪接,而MYC也会因剪接效率低而显著下调,相应地过表达MYC可显著挽救SHQ1失活引起的T-ALL细胞死亡。

之前研究表明MYC是NOTCH1下游重要的靶基因, 但NOTCH1调控MYC的机制尚不清楚。本研究发现在T-ALL中NOTCH1能结合SHQ1的启动子区域激活SHQ1表达,进而调控MYC表达。综上所述,本研究不仅发现了SHQ1在RNA剪接和肿瘤发生中的作用,也阐明了NOTCH1–SHQ1–MYC调控通路,为 MYC基因的表达调控提供了新的见解。

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图1.SHQ1的缺失影响pre-mRNA的剪接效率

(7)参考文献

Su Hexiu,Hu Juncheng,Huang Liang et al. SHQ1 regulation of RNA splicing is required for T-lymphoblastic leukemia cell survival.[J] .Nat Commun, 2018, 9: 4281.


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