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【柏仁医学】动物疾病模型实验专题:变态反应性脑脊髓炎(AE)小鼠模型

变态反应性脑脊髓炎(AE)小鼠模型

模型概述

 

疾病定位CD4+ Th1/Th17 细胞介导的中枢神经系统(CNS)自身免疫病,特征性病理改变为小血管周围炎性细胞浸润髓鞘脱失,是多发性硬化(MS)最经典的模拟模型(J Neuroinflammation, 2024)。


品系选择SJL/J(急性复发型)、C57BL/6(慢性进展型)、B10.PL(超敏型,发病率>95%),推荐 SPF 级 6-8 周龄雌性小鼠(激素水平稳定,发病率差异<5%)。

 

二、标准化建模方案(主动诱导法)

 

关键试剂与剂量

 

 

操作流程(以 C57BL/6 小鼠为例)

 

D0

抗原乳剂制备:MOG35-55(200μg)与等体积 CFA 涡旋乳化 10min(至滴入水面不扩散)

 

背部皮下注射:脊柱两侧 4 点注射(每点 25μL,避开肩胛骨区)


D2

 

腹腔注射 PTX(200ng / 只),增强 CNS 炎症反应(J Immunol Methods, 2023)


D7-D30

 

每日双盲评分(Kono 标准,表 1),记录体重变化(体重下降>15% 启动安乐死)

发病高峰期(D14-18)处死,取脊髓(腰膨大段)、脑干、小脑固定于 4% 多聚甲醛

 

质量控制要点

 

  1. 乳化均一性:显微镜下观察油包水结构,粒径<5μm 占比>90%
  2. 随机分组:采用 GraphPad 随机数生成器,每组 n=8-10(满足 Power=0.8)
  3. 环境控制SPF 级屏障环境,昼夜节律 12h,温度 22±1℃(影响发病率 ±12%)

 

三、模型评价体系(2025 版)

 

临床评分(Kono 标准升级版)

 

免疫病理验证

 

  1. T 细胞表型:脊髓浸润细胞中 CD4+CD44+CD62L-T 细胞占比>65%(流式检测,图 1A)
  2. 细胞因子谱:病灶 IL-17A+IFN-γ 双阳细胞>30%(免疫荧光,图 1B)
  3. 脱髓鞘定量LFB 染色显示脊髓白质脱髓鞘面积>25%(ImageJ 分析,图 1C)

 

核心数据示例(n=10)

 

四、进阶应用场景

 

机制研究

 

  • 血脑屏障动态DAPI 标记 T 细胞示踪,发现发病第 7 天开始穿越脉络丛(图 2)
  • 小胶质细胞极化:流式检测 CD11b+CD68 + 细胞中 M1/M2 比例(EAE 组 3.2:1 vs 对照 0.8:1)

 

药物评价

 

  • 急性期(D7-D14):抑制 Th17 分化(如抗 IL-23 单抗,评分↓45%)
  • 缓解期(D21+):促进髓鞘再生(如 CLEC-2 激动剂,脱髓鞘面积↓62%)

 

新型建模技术

 

  • 光遗传干预AAV-CaMKIIα-ChR2 转染 MOG 特异性 T 细胞,光控发病(Nature Methods, 2025)
  • 人源化模型NSG 小鼠移植人 PBMC+MOG 肽,模拟 MS 患者 T 细胞反应(Cell Stem Cell, 2024)

 

 

五、常见问题与解决方案

 

 

六、2025 年建模规范更新

 

  1. 伦理声明:需标注 ARRIVE 指南 compliance(e.g., 随机化方法、盲法实施)
  2. 数据透明:原始评分表、流式数据上传 Dryad(IF>10 期刊强制要求)
  3. 替代终点:推荐补充 fMRI 扫描(T2 加权像高信号病灶数),与病理结果互证。

 

 

动物实验服务平台

实验动物代养服务

动物饲养

1.屏障环境饲养 :1)屏障环境饲养-小鼠 2)屏障环境饲养-大鼠 3)屏障环境饲养-豚鼠 4)屏障环境饲养-地鼠 5)屏障环境饲养-兔2.普通环境饲养 1)普通环境饲养-犬 2)普通环境饲养-猪 3)普通环境饲养-猴

3.一站式实验操作服务

1)给药服务(注射给药:静脉、腹腔、皮下、皮内、肌肉。消化道给药:灌胃、自由摄取、十二指肠、直肠。其他部位给药:呼吸道、皮肤、脑内、关节腔内、脊髓腔内、滴眼、生殖器等。"2)脏器、组织取样服务:脏器、腺体、淋巴结、骨及软骨、肌肉、肿瘤组织、脑组织、脂肪组织等。3)体液样本采集:血液(眼睑采血、剪尾采血、心脏采血)、尿液、脑脊液、胆汁、腔液。4)其他实验操作观察、拍照、称重、滴鼻、剪尾、人工肿瘤测量、解剖等。

动物模型构建

心脑血管模型

脑缺血及再灌注模型/心脏骤停模型/脑外损伤动物模型/体内血栓动物模型/高血压模型/心力衰竭模型/心肌缺血动物模型/心梗动物模型/阿霉素诱导大鼠心肌病模型/脑损伤动物模型/脑出血动物模型/慢性心力衰竭动物模型/高血压动物模模型/动脉粥样硬化动物模型

神经系统+精神科模型

应激模型/帕金森动物模型/栓塞性脑梗死模型/老年痴呆模型/脊髓损伤动物模型/抑郁症模型/坐骨神经损伤 (周围神经损伤)动物模型/坐骨神经,面神经损伤动物模型/抑郁症动物模型/癫痫模型

呼吸系统模型

肺栓塞模型/慢性肺阻塞模型/肺炎模型/过敏性哮喘动物模型/慢性支气管炎动物模型/肺动脉高压动物模型/肺纤维化模型/急性肺损伤模型/肺间质纤维化动物模型/慢性支气管炎动物模型

消化系统模型

结肠炎(UC)模型/大肠癌动物模型/胃酸分泌模型/胃溃疡模型/急性肝损伤模型/胆结石动物模型/肝炎-肝硬化-肝癌动物模型/肥胖动物模型/非酒精性脂肪肝模型/脓毒症模型/肠炎动物模型/胰腺炎动物模型/肝硬化动物模型/肝纤维化动物模型/酒精肝动物模型

皮下移植瘤药效模型

Mouse皮下移植瘤/Mouse皮下移植瘤(只成瘤)/裸鼠皮下移植瘤/裸鼠皮下移植瘤(只成瘤)

原位瘤模型

肾癌动物模型/裸鼠腹水瘤/裸鼠乳腺癌原位瘤/裸鼠肝原位瘤药效评估/脑胶质瘤动物模型/胃癌动物模型/胰腺癌动物模型/卵巢癌动物模型/肝癌动物模型/直结肠癌动物模型

肿瘤动物模型

裸鼠成瘤/裸鼠肝原位瘤/黑色素瘤动物模型/药理毒理动物实验技术服务/Mouse肺转移瘤/人源肿瘤裸鼠药效评价/Mouse皮下移植瘤药效评估/裸鼠皮下移植瘤药效评估/Mouse肝原位瘤/肺癌动物模型/乳腺癌动物模型

动物行为学

Light/dark box(黑白箱实验)/高压氧舱/足底热痛仪/强迫游泳/跑台实验/大小鼠心电图/平衡木训练/热板/旋转杆实验/旷场实验/大小鼠条件性恐惧/网屏训练/转棒训练/Y迷宫/社交互动(自我捋毛,筑巢、少年玩耍,实物埋藏等)/高空十字架/避暗穿梭/水迷宫

免疫、代谢系统模型

高尿酸血症模型/宫颈癌动物模型/糖尿病眼病模型/高尿酸血症动物模型/亢甲状腺药物诱导的甲减模型/II型糖尿病动物模型/1型糖尿病动物模型

骨科模型

类风湿性关节炎动物模型/骨缺损动物模型/骨折动物模型/骨关节炎动物模型/骨质疏松动物模型

泌尿系统模型

缺血性急性肾衰竭动物模型/子宫内膜异位症模型/肾小管间质纤维化动物模型/膀胱癌动物模型/肾结石动物模型/慢性肾衰竭动物模型/急性肾衰竭动物模型/肾盂肾炎动物模型

五官疾病模型

鼻窦炎模型/鼻炎模型/视网膜损伤模型/牙周炎动物模型/白内障动物模型/视神经损伤动物模型

皮肤科模型

压力性褥疮(PU)模型/硬皮症(SSC)模型/特应性皮炎(AD)模型/伤口愈合:圆形缺损模型/伤口愈合:划痕模型/二度烧伤模型/皮肤损伤模型

转移瘤药效模型

裸鼠肺转移瘤药效评估/裸鼠肺转移瘤

常规脏器手术切除模型

5/6肾切除手术/有创动脉血压/神经吻合手术/输精管结扎手术/去势手术(睾丸摘除)/胃切除手术/肝切除手术/单侧肾切除手术

动物影像学

活体成像/全身骨密度检测/X-ray光/超声成像/大小动物CT

 

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