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RNA免疫共沉淀RIP

(1)实验原理

细胞裂解后,孵育结合了抗体的珠子,诱饵蛋白通过其抗体结合到Beads上,同时和诱饵蛋白互作的RNA,也一起沉淀到Beads上。洗涤掉未结合的RNA后,再用洗脱液将RNA-蛋白复合物从Beads洗脱下来,便得到RNA免疫沉淀产物。RIP产物既可用qPCR检测已知RNA,也可以二代测序检测未知RNA。

当没有合适的诱饵蛋白抗体时,可以通过表达融合了flag标签的诱饵蛋白,利用flag标签做免疫沉淀。即细胞过表达Flag-Bait,经裂解后与anti-Flag珠子孵育,诱饵融合蛋白与Beads结合,与诱饵融合蛋白互作的RNA“共沉淀”到Beads上,再经洗涤、洗脱后做qPCR或NGS测序。

(2)RNA免疫沉淀RIP技术应用

筛选或验证与诱饵蛋白互作的RNA

(3)RNA免疫沉淀RIP服务优势

1)近十年服务经验,客户成果发表在Nature Methods,Cell Research等高水平期刊上;

2)可对围绕RNA结合蛋白开展的整体课题提供全方位方案建议;

3)自有分子及细胞生物实验平台,能有效制定并执行最优的实验路线;

4)售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。

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