外泌体研究

（1）简介

外泌体（Exosomes）是一种直径在40～100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA ( microRNA，miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA（circular RNA，circRNA）。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA，具有完整的序列结构和生物活性。外泌体中大约含几百种miRNAs，通过外泌体miRNA测序，研究人员可获得与疾病相关的遗传特征（生物标志物），为将来肿 瘤治 疗领域通过液体活检来寻找有效药物。

（2）优势

一站式服务

客户只需提供细胞上清、血清、血浆、外泌体RNA，可研生物提为您完成样品准备，文库制备，上机测序到数据分析的整套服务。

商业化试剂盒抽提外泌体

可研生物使用成熟的商业化试剂盒抽提外泌体，极大改善样品的均一性。客户可选择从外泌体到RNA测序一步流程法，也可选择先提取外泌体，在由外泌体抽取RNA两步流程法。

特异性富集miRNA片段

特异性富集和检测miRNA，miRNA有效数据高于其它公司提供的常规small RNA测序服务。

专业的生物信息学分析

可研生物具有强大的生物信息学团队，能够满足客户对数据各类深入的分析要求。

（3）样本要求

样品类型：

细胞、体液或RNA样品。其它类型样品请详询。

样品量：

a) 细胞 2×107

b) 组织 100 mg 

c) 体液 全血、血清、血浆 5 mL  

脑脊液 5 mL  

尿液  100 mL

d) 总RNA 2 μg （OD260/280≥1.8；OD260/230≥1.5，无明显降解，电泳检测样品特征性条带完整清晰，无明显弥散或拖尾 28S：18S≥1.5或者RIN≥7）

样品运输及保存：

样品运输：样品置于1.5mL管中，封口膜封好，干冰运输 

样品保存：细胞样品或新鲜组织块（切成5-10 mg的小块），可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后，-80℃保存，RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，样品保存期间避免反复冻融。

（4）数据分析（下列有※表示个性化分析）

1）差异miRNA筛选与聚类筛选

两组或多组样品间的差异表达miRNA（Fold Change≥2， P值≤ 0.05）

注：Fold Change代 表差异程度，P值代 表差异的明显性，筛选中采用的倍数变化会根据具体数据情况进行调整。

2）miRNA靶基因预测※
云序生物整合了TargetScan、mirBase、miRanda等权威miRNA靶基因预测软件，提供严谨可靠的靶基因预测数据，通过软件预测miRNA的靶基因，从而推测miRNA的生物学功能。

3）miRNA靶基因网络
构建miRNA靶基因网络。

4）miRNA靶基因GO和信号通路分析
对miRNA的靶基因进行GO和信号通路分析，从而帮助推断miRNA的生物学功能。

5）miRNA-靶基因GO或靶基因通路网络分析※
利用miRNA靶基因及靶基因GO或信号通路分析，构建网络图，通过网络图可发现核 心miRNA以及miRNA调控的核 心基因功能。

6）miRNA上游转录因子分析※
预测特定miRNA上游的转录因子结合位点，帮助推断该miRNA的调控机制。

7）新miRNA预测（脊椎动物）
预测尚未被发现的新miRNA。